Fenilgalaktozidas CAS: 2818-58-8

Poveikis fermento aktyvumui: Fenilgalaktozidas dažniausiai naudojamas β-galaktozidazės fermento aktyvumui matuoti. Kai β-galaktozidazė hidrolizuoja fenilgalaktozidą, jis išskiria p-nitrofenolą. P-nitrofenolio kaupimąsi galima kiekybiškai išmatuoti, o tai suteikia įžvalgų apie β-galaktozidazės aktyvumą. Šis poveikis panaudojamas tokiose srityse kaip fermentų tyrimai ir atrankos sistemos.

Genų raiškos analizė: Fenilgalaktozidas dažnai naudojamas kaip substratas molekulinės biologijos eksperimentuose genų raiškai tirti. lacZ genas, koduojantis β-galaktozidazę, dažniausiai yra sujungiamas su kitų dominančių genų reguliavimo sekomis. LacZ geno raiška ir fenilgalaktozido hidrolizė β-galaktozidaze gali rodyti tiriamo tikslinio geno raiškos modelį ir lygį.

Atrankos sistemos: fenilgalaktozidas yra svarbus atrankos sistemų, kurios naudoja β-galaktozidazės aktyvumą, komponentas. Vienas plačiai žinomas pavyzdys yra mėlynai baltas atrankos metodas, naudojamas rekombinantinėms arba transformuotoms ląstelėms identifikuoti molekulinės biologijos eksperimentuose. Kolonijos, kurios sėkmingai pasisavino rekombinantinę DNR arba patyrė genetinę rekombinaciją, ekspresuos β-galaktozidazę, dėl ko fenilgalaktozidas hidrolizuosis ir susidarys mėlyna spalva.

Baltymų gryninimas: Kai kuriais atvejais fenilgalaktozidas gali būti naudojamas kaip ligandas afininės chromatografijos metu, siekiant išvalyti baltymus, kurie specifiškai jungiasi prie β-galaktozidazės arba yra jos aktyvuojami. Susidomėjęs baltymas gali turėti afininę žymę arba susiliejimo žymę, kurioje yra β-galaktozidazę jungiantis domenas. Praleidžiant baltymų mišinį per kolonėlę su imobilizuotu fenilgalaktozidu, norimas baltymas gali būti selektyviai sulaikytas ir vėliau eliuotas.