IPTG CAS:367-93-1 Gamintojo kaina
Izopropilo β-D-1-tiogalaktopiranozidas (IPTG) yra sintetinis laktozės analogas, dažniausiai naudojamas molekulinės biologijos tyrimuose ir biotechnologijose.IPTG pirmiausia naudojamas genų ekspresijai sukelti bakterinėse sistemose, kur jis tarnauja kaip molekulinis trigeris, inicijuojantis tikslinių genų transkripciją.
Įdėjus į auginimo terpę, IPTG pasisavina bakterijos ir gali prisijungti prie lac represoriaus baltymo, neleidžiant jam blokuoti lac operono veiklos.Lac operonas yra laktozės metabolizme dalyvaujančių genų spiečius, o pašalinus represoriaus baltymą, genai ekspresuojami.
IPTG dažnai naudojamas kartu su lacUV5 mutantiniu promotoriumi, kuris yra konstituciškai aktyvi lac promotoriaus versija.Derindami IPTG indukciją su šiuo mutantiniu promotoriumi, mokslininkai gali pasiekti aukštą genų ekspresijos lygį.Tai leidžia gaminti didelius baltymų kiekius gryninimui ar kitiems tikslams.
Be genų ekspresijos, IPTG taip pat dažnai naudojamas mėlynos / baltos spalvos atrankos tyrimuose.Taikant šį metodą, lacZ genas paprastai suliejamas su dominančiu genu, o bakterijos, kurios sėkmingai ekspresuoja šį suliejimo geną, gamins aktyvų β-galaktozidazės fermentą.Kai IPTG pridedamas kartu su chromogeniniu substratu, pvz., X-gal, bakterijos, ekspresuojančios sulietą geną, pasidaro mėlynos dėl β-galaktozidazės aktyvumo.Tai leidžia identifikuoti ir atrinkti rekombinantines padermes, kurios sėkmingai integravo dominantį geną.
Genų ekspresijos indukcija: IPTG dažniausiai naudojamas tikslinių genų ekspresijai sukelti bakterijų sistemose.Jis imituoja natūralų laktozės induktorių ir jungiasi prie lac represoriaus baltymo, neleidžiant jam blokuoti lac operono.Tai leidžia transkripuoti ir ekspresuoti norimus genus.
Baltymų ekspresija ir gryninimas: IPTG indukcija dažnai naudojama gaminant didelius kiekius rekombinantinių baltymų įvairiems tikslams, pavyzdžiui, biocheminiams tyrimams, terapinei gamybai ar struktūrinei analizei.Naudodami tinkamus ekspresijos vektorius ir IPTG indukciją, mokslininkai gali pasiekti aukštą tikslinių baltymų gamybos lygį bakterijų šeimininkuose.
Mėlyna/balta atranka: mėlynos/baltos atrankos tyrimams IPTG dažnai naudojamas kartu su lacZ genu ir chromogeniniu substratu, pvz., X-gal.LacZ genas paprastai yra sulietas su dominančiu genu, o bakterijos, kurios sėkmingai ekspresuoja šį suliejimo geną, gamins aktyvų β-galaktozidazės fermentą.Pridėjus IPTG ir chromogeninį substratą, rekombinantinės padermės, ekspresuojančios sulietą geną, pasidaro mėlynos, todėl galima lengvai identifikuoti ir atrinkti.
Genų reguliavimo tyrimas: IPTG indukcija dažniausiai naudojama tiriant genų ir operonų, ypač lac operono, reguliavimą.Manipuliuodami IPTG koncentracijomis ir stebėdami lac operono komponentų ekspresiją, mokslininkai gali ištirti genų reguliavimo mechanizmus ir įvairių veiksnių ar mutacijų vaidmenį.
Genų ekspresijos sistemos: IPTG yra esminis komponentas keliose genų ekspresijos sistemose, tokiose kaip T7 promotoriumi pagrįstos sistemos.Šiose sistemose lac promotorius dažnai naudojamas T7 RNR polimerazės ekspresijai paskatinti, kuri savo ruožtu transkribuoja tikslinius genus, kontroliuojamus T7 promotoriaus sekų.IPTG naudojamas T7 RNR polimerazės ekspresijai sukelti, todėl aktyvuojama tikslinio geno ekspresija.
| Sudėtis | C9H18O5S |
| Analizė | 99 % |
| Išvaizda | Balti milteliai |
| CAS Nr. | 367-93-1 |
| Pakavimas | Mažas ir masyvus |
| Galiojimo laikas | 2 metai |
| Sandėliavimas | Laikyti vėsioje ir sausoje vietoje |
| Sertifikavimas | ISO. |
